Quyida bilvosita immunofluoresans boʻyash protokolining turli bosqichlari haqida umumiy maʼlumot berilgan
- Tajriba rejalashtirish va namuna tayyorlash. …
- Fiksatsiya namunasi. …
- Hujayra o'tkazuvchanligi. …
- Bloklanmoqda. …
- Birlamchi antikor inkubatsiyasi. …
- Ikkilamchi antikor inkubatsiyasi. …
- Koʻrish va oʻrnatish.
Immunofloressensiyani qanday amalga oshirasiz?
Barcha inkubatsiya bosqichlari xona haroratida amalga oshiriladi
- Hujayralarni ikki marta yuving va pinset yordamida yuqoriga koʻtarilgan xujayralar bilan qopqoqni namlangan kameraga ehtiyotkorlik bilan joylashtiring.
- 4% formaldegid bilan 10 daqiqa davomida mahkamlang va 3 × yuving.
- 0,1 % TX-100/PBS bilan 15–20 daqiqa davomida oʻtkazing va 3 × yuving.
Hujayrada immunofluoressensiyadan qanday foydalanasiz?
Birikuvchi hujayralar uchun immunofluoresans protokoli
- 500 ml madaniy muhitda 4 kamerali slaydning har bir qudug'iga 1–1,5 x104 urug'. 37°C da 5% CO2 da inkubatsiya qiling.
- Hujayra ekishdan 32–36 soat oʻtgach, hujayra madaniyati muhitini olib tashlang va 500 µL 1X PBS yordamida hujayralarni 3 marta yuving.
Immunofloressensiyaga qanday misol?
Masalan, tadqiqotchi echkida birlamchi antikorlarni yaratishi mumkin, ular bir nechta antijenlarni taniydilar, so'ngra echki antikorining doimiy hududini taniydigan bo'yoq bilan bog'langan quyon ikkilamchi antikorlaridan foydalanishi mumkin ( quyon echkiga qarshi antikorlar).
Immunofluoresans usulida bo'yash nima uchun?
Immunofluoresans (IF) bilan bo'yash biologik tadqiqotlar va klinik diagnostikada keng qo'llaniladigan texnikasi hisoblanadi IF maxsus maqsadli antijenlarni aniqlash uchun floresan yorliqli antikorlardan foydalanadi. Tasvirdan keyin bu juda to'g'ridan-to'g'ri texnikadir, chunki siz haqiqatda biror narsani ko'rishingiz mumkin.