Vortexing RNKni qirqib tashlamaydi, agar siz tasodifiy RT tayyorlayotgan bo'lsangiz, uni yaroqsiz holga keltirmaydi - faqat uzun mRNKni klonlashni istasangiz. Invitrogen texnik yordami ham to'g'ri. Xloroform Trizoldan og'irroq va trubaning tubiga tushadi.
RNKni vorteks qilish xavfsizmi?
Trizol lizatlari yoki RNK namunalarini qirqib yubormaslik uchun aylantirmang. Ekstraktsiyadan keyin RNK namunalarini doimo muz ustida saqlang. Ushbu protokol 1,5 yoki 2 ml li naychada 1 ml Trizol lizislangan namunalar uchun mo'ljallangan.
RNKni qizdira olasizmi?
Shuning uchun yuqori haroratlardan saqlaning ( +65°C dan yuqori) chunki bular RNKning yaxlitligiga ta'sir qiladi. Buning o'rniga, ikkilamchi tuzilmalarni eritish uchun RNKni denaturatsiya qiluvchi tamponlar ishtirokida 15 daqiqa davomida +65°C ga qizdiring.
RNK pelletlarini qanday qilib qayta suspenziya qilish mumkin?
pelletingizni iliq suv bilan (40-50°C) qayta toʻkib tashlang. 45 ° C da 10 daqiqa davomida inkubatsiya qiling. ularni 4-6 soat davomida +4 ichiga qo'ying.
RNKni qanday cho'ktirasiz?
A.
Tuz konsentratsiyasi sozlangandan soʻng, RNKni 2,5 hajm etanol yoki 1 hajm izopropanol qoʻshib, yaxshilab aralashtirish orqali choʻktirish mumkin, keyin -20°C da kamida 15 daqiqa sovutib oling.